高效液相色譜(HPLC)也叫高壓液相色譜、高速液相色譜、高分離度液相色譜等,是在傳統(tǒng)液相色譜基礎(chǔ)上,于1955年后隨著氣相色譜理論發(fā)展而逐漸發(fā)展起來(lái)的?,F(xiàn)在液相色譜法在色譜的科學(xué)研究、儀器先進(jìn)程度、實(shí)際操作等各方面已取得長(zhǎng)遠(yuǎn)發(fā)展。液相色譜技術(shù)被大家應(yīng)用在醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、化學(xué)、生化、工業(yè)、農(nóng)業(yè)、環(huán)保、食品、商檢和法檢各個(gè)領(lǐng)域。液相色譜法作為制藥行業(yè)中現(xiàn)有技術(shù)中為較為先進(jìn)的,且已成為醫(yī)藥開(kāi)發(fā)及檢測(cè)所離不開(kāi)的。
高效液相色譜儀在醫(yī)藥領(lǐng)域的作用:
1.藥物生產(chǎn)中進(jìn)行中間控制:生產(chǎn)抗菌素時(shí),首先要了解發(fā)酵液中的主體與付產(chǎn)物的存在情況。例如:青霉素、四環(huán)素、頭孢子菌素、紅霉素、柔紅霉素、慶大霉素等的發(fā)酵產(chǎn)物,均可用C18柱和甲醇及緩沖液配制的流動(dòng)相或用離子對(duì)法,分析主體及其收產(chǎn)物的含量。對(duì)普魯卡因酰胺、茶堿等可進(jìn)行主體含量的測(cè)定,對(duì)硝酸*油可測(cè)定主體含量及其降解產(chǎn)物,以便保證藥物的熱量。
2.分離分析藥物的組分含量:由于一種藥劑常含有多組分,一次即可將各維生素B6、D1、A、E同時(shí)分離并定出含量。又如止痛藥或退燒藥也可用此法分離并測(cè)得各組分的含量。
3.測(cè)定藥物在各種器官中的代謝產(chǎn)物:特別是研究藥物的代謝產(chǎn)物在血清中存在的情況。如測(cè)血清中的酮酸及戊二酸。測(cè)尿中代謝產(chǎn)物更為方便,不需要繁鎖的預(yù)處理。因?yàn)檠芯磕蛑械慕M分能鑒別病人的代謝功能,對(duì)病理研究或監(jiān)床診斷均具有重要的參考價(jià)值。
4.分析藥物在體內(nèi)的殘量:這是近來(lái)研究新藥效能很主要的內(nèi)容之一,如冬凌草甲素是植物中的一組分,有抗癌效果,但是毒性大。測(cè)定其在血清中含量很重要,現(xiàn)在可用C18柱及甲醇水為流動(dòng)相,測(cè)定處理后的血清樣品,即可得到血中的含量。如磺胺類(lèi)藥品在血清及尿中含量也不允許太大,可用C18柱及酸性乙醇為流動(dòng)相,測(cè)定含量后,則可估計(jì)更合適的用藥劑量。又如四環(huán)素、巴*妥酸、止痛藥、退燒藥、護(hù)糖尿病的藥物等,在血或尿中的含量都可用C18柱用甲醇、水為流動(dòng)相來(lái)測(cè)定含量。因此,反相色譜法應(yīng)用范圍極廣。
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